Papel do antígeno ovular solúvel (SEA) de Schistosoma Mansoni sobre a hematopoese murina

Abstract

Durante a infecção pelo Schistosoma mansoni, os ovos do parasito ficam retidos em órgãos como fígado, baço e intestino, originando granulomas. Em estudos anteriores, nosso grupo de pesquisa utilizou modelos murinos para caracterizar a hematopoese extramedular na periferia de granulomas hepáticos e alterações na hematopoese medular. No entanto, os fatores que modulam a hematopoese murina durante a infecção esquistossomótica ainda são amplamente desconhecidos, e por isso decidimos investigar o papel dos antígenos ovulares solúveis (SEA) liberados pelos ovos do parasita nesta modulação hematopoética. Ovos de S. mansoni foram isolados de fígados de camundongos infectados e utilizados no protocolo de produção e purificação de SEA, que foi administrado em grupos de camundongos com injeções diárias ou uma única injeção, nas doses de 10, 20 e 80 µg e eutanasiados 24 ou 96 h após a última injeção. O sangue periférico foi coletado para análises hematológicas e bioquímicas, além de órgãos e medulas ósseas para análises histológicas e de imunofluorescência. A caracterização proteômica do SEA foi realizada por eletroforese de proteínas, digestão de peptídeos em solução e análise por espectrometria de massas. Na dose de 10 µg, observamos 8 alterações hepáticas agudas, com intensa vacuolização intracitoplasmática dos hepatócitos e esteatose. Nas doses de 20 e 80 µg, notamos progressão desses efeitos toxicológicos, com aumento da retenção de sangue nos canalículos hepáticos e vasos portais maiores, e algum extravasamento para o tecido, indicando um baixo grau de hemorragia hepática. Observamos mitose frequente em todas as doses aplicadas. Também observamos uma redução acentuada nos grânulos de glicogênio, indicando uma possível alteração metabólica mediada por componentes do SEA. Nos rins, observamos importante acúmulo e extravasamento de sangue nas regiões medulares e corticais, além da degradação dos ductos renais, e aumento dos depósitos de ferro no baço, principalmente hemossiderina, bem como nas células de Kupffer. Em relação ao possível envolvimento do SEA nos processos hematopoiéticos, notamos um aumento de algumas populações celulares no baço de animais que receberam injeções de SEA, principalmente na polpa vermelha. Focos de eosinófilos foram observados próximos à cápsula e zona trabecular, com poucas células Ki-67-positivas, o que não indica proliferação eosinofílica local, mas sim mobilização. Em contraste, alguns megacariócitos e muitos neutrófilos e macrófagos na região da polpa vermelha foram positivos para Ki-67, indicando proliferação local. Alterações de coagulação também foram identificadas através de achados histológicos e de coagulograma, sugerindo uma resposta mais rápida nos animais injetados com SEA. Por fim, mostramos usando métodos de proteômica, que o SEA possui um perfil proteico bastante heterogêneo, com milhares de proteínas, conforme descrito na literatura. Assim, podemos concluir com os experimentos in vivo, que o SEA total possui muitos componentes tóxicos e imunogênicos, que podem diminuir e até suprimir as modulações hematopoéticas observadas na formação do granuloma hepático, quando comparado ao modelo de estudo de infecção pelo S. mansoni