Please use this identifier to cite or link to this item:
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/66383
PERFIL DE EXPRESSÃO DOS MIRNAS MEMBROS DO CLUSTER C19MC EM AMOSTRAS DE SORO/PLASMA DE GESTANTES COM COMPLICAÇÕES OBSTÉTRICAS ATRIBUÍDAS ÀS INFECÇÕES PELOS VÍRUS ZIKA E CHIKUNGUNYA
Infecção por Zika vírus -- compl
Febre de Chikungunya -- compl
Vírus Chikungunya
Zika vírus
microRNAs -- sangue
Complicações Infecciosas na Gravidez
Simulação por Computador
Estudos Transversais
Estudos de Casos e Controles
Infecção por Zika vírus
Febre de Chikungunya
Vírus Chikungunya
Zika vírus
microRNAssangue
Complicações Infecciosas na Gravidez
Simulação por Computador
Estudos Transversais
Estudos de Casos e Controles
Gravidez
Silva, Raldney Ricardo Costa da | Date Issued:
2024
Co-advisor
Comittee Member
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.
Abstract in Portuguese
Os microRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificantes que desempenham papéis cruciais na regulação da expressão gênica. A função antiviral associada a essas moléculas, especialmente a membros do cluster de miRNAs do cromossomo 19 (C19MC), tem sido objeto de estudo em gestantes, uma vez que são expressos majoritariamente na placenta. Durante a gravidez, as infecções por Zika (ZIKV) e Chikungunya (CHIKV) estão relacionadas a diversas complicações obstétricas (CO) como síndromes hipertensivas, síndrome HELLP, por exemplo. Nesse contexto, este estudo examinou a expressão dos miRNAs hsa-miR-512-3p, hsa-miR-516b-5p, hsamiR-517-5p e hsa-miR-525-5p circulantes, membros do C19MC, em gestantes com CO atribuídas às infecções por ZIKV ou CHIKV. Amostras de soro/plasma de gestantes com CO infectadas (n= 122) ou não infectadas (n= 39) e gestantes sem CO infectadas (n= 76) foram analisas quanto ao nível de expressão dos miRNAs por qPCR e a expressão relativa foi calculada usando o ACTB como gene endógeno. Para os miRNAs detectados, a correlação entre seus níveis de expressão e dados clínicolaboratoriais foi avaliada e as vias biológicas reguladas por seus genes alvos foi verificada in sílico por meio do miRTarBase e Enrichr. Diferenças foram consideradas significativas para valor de p<0,05. O protocolo de pesquisa foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Aggeu Magalhães (CAAE: 9404519.3.0000.5190). Apenas o hsa-miR-516b-5p foi detectado nas amostras analisadas, por isso, as análises foram feitas apenas para ele. Para fins de análise, o perfil de expressão foi avaliado considerando a infecção sem distinção do tipo de vírus e, posteriormente, estratificado por vírus. Na análise conjunta, o hsa-miR-516b-5p revelou-se mais expresso em gestantes com CO infectadas (p = 0,0012) em relação às não infectadas. Mulheres infectadas sem CO apresentaram níveis de expressão ainda maiores em comparação às mulheres com CO (p = 0,0142). Na análise estratificada, esse padrão de expressão foi mantido para ZIKV, com níveis maiores entre infectadas com CO (p= 0,0330) e ainda maiores na ausência de CO (p = 0,0037). Para CHIKV, a diferença foi observada apenas entre mulheres infectadas com CO (p = 0,0083). Correlações negativas foram observadas entre a expressão do hsa-516b-5p e a concentração de linfócitos (U/L) em gestantes com CO infectadas (r= - 0,2016, p= 0,0477). Foram identificadas 8 vias moleculares significativamente enriquecidas e as funções moleculares identificadas estão, na maioria, relacionadas a processos de regulação do ciclo de vida viral e modificações dos mRNA alvos. Concluímos que níveis elevados do hsa-miR-516b-5p na circulação de gestantes com complicações obstétricas ou não se associam com a exposição materna os vírus Zika e Chikungunya.
Abstract
MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that play crucial roles in regulating
gene expression. The antiviral function associated with these molecules, especially
members of the chromosome 19 miRNA cluster (C19MC), has been the subject of
study in pregnant women since they are mainly expressed in the placenta. During
pregnancy, Zika (ZIKV) and Chikungunya (CHIKV) infections are related to several
obstetric complications (OC), such as hypertensive syndromes and HELLP syndrome,
for example. In this context, this study examined the expression of the circulating
miRNAs hsa-miR-512-3p, hsa-miR-516b-5p, hsa-miR-517-5p, and hsa-miR-525-5p,
members of C19MC, in pregnant women with CO attributed to ZIKV or CHIKV
infections. Serum/plasma samples from pregnant women with OC infected (n= 122) or
uninfected (n= 39) and pregnant women without infected OC (n= 76) were analyzed
for the expression level of miRNAs by qPCR and the relative expression was calculated
using ACTB as an endogenous gene. For the detected miRNAs, the correlation
between their expression levels and clinical-laboratory data was evaluated and the
biological pathways regulated by their target genes were verified in silico using
miRTarBase and Enrichr. Differences were considered significant when p<0.05. The
research protocol was approved by the Research Ethics Committee of the Aggeu
Magalhães Institute (CAAE: 9404519.3.0000.5190). Only hsa-miR-516b-5p was
detected in the analyzed samples, therefore, analyses were performed only for it. For
analysis purposes, the expression profile was evaluated considering the infection
without distinction of the type of virus and, subsequently, stratified by virus. In the
pooled analysis, hsa-miR-516b-5p was found to be more expressed in CO-infected
pregnant women (p = 0.0012) compared to uninfected women. Infected women without
CO showed even higher expression levels compared to women with CO (p = 0.0142).
In the stratified analysis, this expression pattern was maintained for ZIKV, with higher
levels among those infected with CO (p = 0.0330) and even higher in the absence of
CO (p = 0.0037). For CHIKV, the difference was observed only among women infected
by CO (p = 0.0083). Negative correlations were observed between hsa-516b-5p
expression and lymphocyte concentration (U/L) in CO-infected pregnant women (r= -
0.2016, p= 0.0477). 8 significantly enriched molecular pathways were identified and
the identified molecular functions are mostly related to processes that regulate the viral
life cycle and target mRNA modifications. We conclude that high levels of hsa-miR 516b-5p in the circulation of pregnant women with obstetric complications or not are
associated with maternal exposure to Zika and Chikungunya viruses.
Keywords in Portuguese
MicroRNAs -- fisiopatolInfecção por Zika vírus -- compl
Febre de Chikungunya -- compl
Vírus Chikungunya
Zika vírus
microRNAs -- sangue
Complicações Infecciosas na Gravidez
Simulação por Computador
Estudos Transversais
Estudos de Casos e Controles
DeCS
MicroRNAsInfecção por Zika vírus
Febre de Chikungunya
Vírus Chikungunya
Zika vírus
microRNAssangue
Complicações Infecciosas na Gravidez
Simulação por Computador
Estudos Transversais
Estudos de Casos e Controles
Gravidez
Share