Estudo pré-clínico para avaliação de novas estratégias terapêuticas de enfrentamento da cromoblastomicose

Abstract

A cromoblastomicose (CBM) é uma doença fúngica negligenciada que acomete tecido cutâneo e subcutâneo causada por implantação traumática, tendo como agentes etiológicos fungos demáceos distribuídos por diversas espécies. Diferentes fungos podem causar CBM, tais como: Fonsecaea pedrosoi, Fonsecaea nubica, Fonsecaea monophora, Phialophora verrucosa, Cladophialophora carrionii, Rhinocladiella aquaspersa, Rhinocladiella similis, Exophiala dermatitidis, Exophiala heteromorpha entre outros. A terapia da CBM é longa e está associada a baixas taxas de cura e altas taxas de recaída. Além disso, não existe um padrão de tratamento a seguir, sendo necessário administrar mais de um fármaco e fazer uso de métodos físicos na maioria dos casos. Itraconazol (ITZ) e terbinafina (TRB) são os fármacos mais usados no tratamento da CBM. Visto que há poucos antifúngicos que podem ser utilizados no tratamento da CBM, um estudo não clínico envolvendo substâncias já estabelecidas para outras doenças e com citotoxicidade conhecida permitirá uma avaliação de potenciais novos fármacos que poderão ser, no futuro, incluídos em ensaios clínicos para o tratamento da CBM. O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade antifúngica, bem como a aplicabilidade em novas estratégias terapêuticas, de substâncias presentes nas bibliotecas Pathogen Box e NIH Clinical Colletion contra os agentes da CBM A triagem inicial com as substâncias das coleções a 1µM e 10µM, respectivamente, foi realizada com um isolado clínico de F. pedrosoi, de acordo com o protocolo EUCAST para fungos filamentosos. As substâncias que inibiram mais de 60% do crescimento fúngico foram avaliadas de acordo com a aplicabilidade para CBM, índice de seletividade e concentração inibitória/fungicida mínima (CIM/CFM) contra os diferentes agentes da doença, sendo eles: F. pedrosoi, F. monophora, F. nubica, P. verrucosa, C. carrionii, E. dermatitidis, E. heteromorpha e R. similis. Foi realizada a análise in vitro de potencial sinergismo dessas substâncias frente aos fármacos já utilizados no tratamento da CBM (ITZ e TRB e/ou anfotericina B). A análise da Pathogen Box revelou as substâncias auranofina, iodoquinol e MMV021013 como promissoras. Já na NIH Clinical Collection foram selecionadas, com base nos critérios acima, as substâncias carmofur, albendazol, mebendazol e tiabendazol. Após teste de sinergismo, foi determinado o índice da concentração inibitória fracionada (ICIF), onde foi observada interação sinérgica na combinação de auranofina com ITZ (ICIF = 0,37), carmofur com ITZ (ICIF = 0,31) e carmofur com anfotericina B (ICIF = 0,37). O rastreio da Pathogen Box com concentrações subinibitórias de ITZ revelou duas novas moléculas promissoras para o tratamento da CBM em combinação com este azólico: MMV687273 e MMV688415. Além disso, foi observada superioridade do albendazol em comparação com outros benzimidazóis, que foram comparados pela sua ação in vitro frente aos agentes de CBM. A superioridade de carmofur frente a 5-FC, ambos análogos de pirimidina, foi também mostrada mediante o acervo de substâncias testadas, os resultados desse estudo sugerem alternativas que possam futuramente ser usadas como fármacos promissores no tratamento da CBM