Avaliação do efeito do veneno da serpente Bothrops atrox sobre a funcionalidade de células dendrítica

Abstract

Os acidentes ofídicos representam um sério problema de saúde pública, especialmente no Brasil, onde serpentes peçonhentas dos gêneros Crotalus, Lachesis, Micrurus e Bothrops são clinicamente relevantes. A serpente Bothrops atrox, em particular, é responsável pelo maior número de acidentes ofídicos na região norte do país. A peçonha dessas serpentes contém proteínas com efeitos locais e sistêmicos, desencadeando reações pró-inflamatórias cruciais para a resposta imune. Dentre as células do sistema imunológico, as células dendríticas (DCs) desempenham um papel essencial na interface entre imunidade inata e adaptativa. Podemos classificar as DCs em quatro tipos: mielóide, plasmocitóide, Langherans e derivadas de monócitos. As células dendríticas derivadas de monócitos (moDCs) estão particularmente envolvidas em processos inflamatórios geradas in vitro pela combinação de IL-4 e GM-CSF, resultando em populações heterogêneas com propriedades fenotípicas e estimuladoras distintas. Apesar da importância das DCs no contexto do ofidismo, há escassos relatos na literatura sobre a ação do veneno dessas serpentes nestas células. Nesse sentido o objetivo geral do presente estudo foi avaliar o efeito do veneno da serpente Bothrops atrox sobre a funcionalidade de DCs obtidas a partir de células mononucleares do sangue periférico humano (PBMCs) e de progenitores da medula óssea de camundongos. Para isso foram avaliados a viabilidade celular e a imunofenotipagem das DCs derivadas de monócitos humanos e da medula óssea de camundongos para diversos marcadores, assim como a produção de citocinas IL-1β, IL-6, TNF-α, IL-12, IL-10 e do mediador lipídico PGE2, a ativação celular por meio da expressão dos marcadores CD80 e CD83, e pôr fim a expressão de proteínas associadas à apresentação de antígenos e maturação: TAP1. Os resultados mostraram que a diferenciação das DCs humanas mostrou alta viabilidade celular (98%) e expressão de marcadores específicos como CD14, CD11c, CD1a, CD282 e MHC-II. A produção de citocinas como TNF-α, PGE2 e IL-6 aumentou significativamente após a estimulação com LPS. As BMDCs de camundongos também mostraram resposta ao veneno, com alteração na expressão de marcadores como MHC-II e CD86, e aumento na produção de citocinas pró-inflamatórias. A expressão de TAP1 diminuiu após a estimulação com veneno, indicando uma possível modulação negativa na capacidade de apresentação de antígenos dessas células. A produção de citocinas como IL-1β, TNF-α e IL-6 aumentou significativamente após a estimulação com LPS. No entanto, o veneno não induziu níveis detectáveis de TNF-α e IL-1β, mas houve liberação significativa de IL-6. Tomados conjuntos os dados obtidos permitem concluir que o veneno de B. atrox afeta a funcionalidade das DCs tanto humanas quanto murinas.