Avaliação da antigenicidade e imunogenicidade da PvRMC-1, uma proteína recombinante quimérica e multiestágio, e do seu potencial como candidato vacinal contra o Plasmodium vivax

Abstract

O Plasmodium vivax é considerada a espécie causadora de malária mais dispersa geograficamente, gerando importante impacto socioeconômico e apresentando dificuldades envolvendo seu controle e um desafio no âmbito do desenvolvimento de uma vacina. Tendo em vista os impactos gerados por essa enfermidade, uma vacina representaria a estratégia com melhor custo-benefício, além de uma potente ferramenta de saúde pública. Tendo em vista a complexidade do ciclo evolutivo do parasito, o uso de proteínas candidatas vacinais representantes dos diferentes estágios do ciclo representaria uma abordagem interessante. A partir desse racional, apresentamos nesse trabalho a construção e a avaliação da antigenicidade e da imunogenicidade da proteína denominada PvRMC-1 (Proteína Recombinante Quimérica -1). Desse modo (Artigo 1), a proteína PvRMC-1 foi construída, características estruturais foram determinadas e a antigenicidade de seus epítopos constituintes foi avaliada utilizando amostras de plasma de indivíduos naturalmente expostos a malária da Amazônia brasileira. A análise estrutural da proteína PvRMC-1 sugere que ela possui estabilidade, dado a presença de muitas pontes de hidrogênio e característica hidrofílica, sugestiva de menor possibilidade de apresentar reatogenicidade. A proteína foi considerada antigênica com mais da metade de reconhecimento direcionada para IgG (54%) e IgM (40%), tendo a prevalência das subclasses IgG1 (70%) e IgG3 (69%). Além disso, os níveis de IgM e IgG foram inversamente correlacionados com o tempo desde a última infecção e com correlação positiva entre si (IgG vs. IgM). Esses achados demonstraram o sucesso no desenho e expressão dessa proteína, mantendo sua estrutura estável, além da sua antigenicidade. Contudo ainda não se sabia qual seria o potencial dessa proteína como imunizante. Com isso, foi avaliada a imunogenicidade da PvRMC-1, com a imunização de grupos de camundongos BALB/c com a PvRMC-1 associada aos adjuvantes Stimune, AddaVax ou Al(OH)₃ (Artigo 2). A PvRMC-1 foi considerada imunogênica, com a presença de altas titulações de IgG em todos os grupos de animais imunizados, com destaque para as respostas obtidas nos grupos com os adjuvantes Stimune e AddaVax, com a prevalência de IgG1, seguido de IgG2a e IgG2b. Em relação à resposta imune celular, observamos que o grupo PvRMC-1 + Stimune apresentou os maiores níveis de IFN-y seguido do grupo com Al(OH)₃. De forma complementar, ao realizar uma análise de simulação em humanos utilizando o candidato vacinal PvRMC-1, na ausência de adjuvantes, reforçam o potencial promissor deste candidato vacinal. Assim, no modelo murino, as análises de imunogenicidade da proteína PvRMC-1 associada aos adjuvantes Stimune, AddaVax e Al(OH)₃ representaram as melhores respostas, respectivamente e com base na simulação em humanos, nós sugerimos a utilização da formulação vacinal composta pela PvRMC-1 associada aos adjuvantes AddaVax e Al(OH)₃, que apresentaram os dados mais promissores na indução das respostas mediadas por células B e T, respectivamente, associados à melhor avaliação em relação à segurança e reatogenicidade.