Detecção molecular de Leishmania e Leishmaniavirus 1 em lesões cutâneas e mucosa nasal sadia de pacientes com leishmaniose cutânea com diferentes respostas ao tratamento com antimoniato de meglumina

Abstract

Pacientes diagnosticados com leishmaniose cutânea (LC) podem apresentar disseminação hemática e/ou linfática de parasitos, com potencial envolvimento da mucosa nasal e/ou oral (leishmaniose mucosa - LM). Estudos apontam que a detecção precoce de parasitos na mucosa nasal sadia representa um sinal de disseminação, com possível mau prognóstico. Um dos fatores associados à LM é o endossimbionte Leishmania RNA Virus 1 (LRV1), um potente imunógeno inato, associado a persistência e disseminação do parasito. Em Rondônia, além da diversidade de espécies de Leishmania, o LRV1 é detectado em 36% dos parasitos circulantes. Posto isto, objetivamos investigar a relação entre a disseminação precoce do parasito e o desfecho terapêutico, avaliando a detecção e quantificação da carga parasitária de Leishmania e detecção de LRV1 nas lesões cutâneas e mucosa nasal sadia de pacientes com leishmaniose cutânea localizada (LCL) em três momentos: i) antes do tratamento com antimoniato de meglumina (D-0), ii) na conclusão do tratamento convencional (D-20), iii) entre 90 e 180 dias após a conclusão do tratamento (D-90). Foram realizadas coletas de amostras da mucosa nasal sadia e da lesão cutânea, excluindo lesão cicatrizada em D-20 ou D-90, para identificação de espécie e qPCR para Leishmania (18S) e LRV1. 178 pacientes foram triados com exames e destes, a infecção por Leishmania foi confirmada em 113 (84,07% pelo exame parasitológico direto e 97,34% por qPCR). Entre os 113 com diagnóstico confirmado de LC, o LRV1 foi detectado na lesão cutânea de 39 pacientes (34,51%). Nas análises da mucosa nasal sadia, em 14 de 113 (12,38%) pacientes foi detectado DNA de Leishmania. Na pesquisa de LRV1 na mucosa de 87 pacientes com diagnóstico confirmado de LT, em 21 (24,13%) pacientes foi detectado LRV1. Houve diferenças na sensibilidade de detecção dos microrganismos na mucosa. Entre 14 pacientes supracitados com DNA de Leishmania na mucosa, 10 (66,67%) apresentavam alta carga de Leishmania na lesão cutânea em D-0 e, dos 21 com LRV1 na mucosa, 11 (52,38 %). Observamos que pacientes que testaram positivo para LRV1 na lesão têm uma maior chance de apresentar parasito na mucosa nasal. O seguimento clínico completo foi realizado com 38 pacientes, que entre D-20 e D-90 evoluíram com padrão favorável (n=28) ou desfavorável (n=10). Quando ajustamos o modelo multivariado levando em consideração o D-0, observamos que das três variáveis consideradas (i.e carga parasitária de Leishmania na lesão cutânea, LRV1 na lesão e parasito na mucosa nasal), houve uma associação entre carga parasitária da lesão cutânea e insucesso terapêutico com OR de 5.63 (IC 95%: 1,73 – 47,25). Os resultados encontrados reforçam a importância da carga parasitária não só restrita ao diagnóstico, mas como biomarcador relacionado ao desfecho terapêutico da LCL. Por fim, o acompanhamento clínico prolongado é importante para o entendimento da evolução da doença, que pode levar anos, essencialmente considerando o elevado número de pacientes com detecção de Leishmania e LRV1 na mucosa nasal sadia. Como a LM é silenciosa até atingir estágios avançados, entender a dinâmica e distribuição da Leishmania e do LRV1 é essencial para direcionar as estratégias terapêuticas, promovendo uma reflexão sobre a adoção de novos esquemas terapêuticos em algumas circunstâncias.