Vigilância genômica do Plasmodium falciparum: frequência das deleções dos genes pfhrp2 e pfhrp3 em áreas endêmicas do Brasil

Abstract

Introdução: Os testes rápidos para diagnóstico de malária (RDTs), usados em áreas de difícil acesso, são baseados na identificação de antígenos específicos de Plasmodium spp. e têm sido muito úteis para o diagnóstico de espécie, pilar fundamental para a eliminação da doença. Os mais comuns são os RDTs baseados na Proteína 2 Rica em Histidina (HRP2) de P. falciparum. A proteína 3 Rica em Histidina (HRP3), também presente no P. falciparum é um análogo estrutural do antígeno HRP2 e por isso pode ter reação cruzada com o HRP2 nesses testes. O antígeno HRP2 é expresso pelo gene pfhrp2, enquanto o antígeno HRP3 é expresso pelo gene pfhrp3. São crescentes os estudos que relatam deleções dos genes pfhrp2 e pfhrp3 em populações de P. falciparum em diversos países endêmicos para malária, inclusive em países que fazem fronteira com o Brasil. A confirmação da presença de parasitos com essas deleções em áreas endêmicas do país é fundamental, visto que indivíduos infectados por P. falciparum com deleção dos genes pfhrp2/3 podem apresentar resultados falsos negativos no RDT. O objetivo deste estudo foi monitorar a deleção dos genes pfhrp2/3 em amostras clínicas de P. falciparum obtidas de áreas endêmicas do país, contribuindo para a vigilância genômica da malária. Método: Foram analisadas 274 amostras de indivíduos sintomáticos infectados por P. falciparum coletadas durante as ações de vigilância epidemiológica do serviço nos municípios de Mâncio Lima, Rodrigues Alves e Cruzeiro do Sul no Vale do rio Juruá no Acre, e em Boa Vista em Roraima. O diagnóstico de Plasmodium spp. foi realizado através da gota espessa e confirmado pela detecção do gene 18S de rRNA por PCR. A qualidade do DNA foi confirmada pela amplificação do gene pfmsp2. A detecção dos genes pfhrp2 e pfhrp3 foi realizada de acordo com protocolos publicados e bem padronizados pela OMS. Resultados: Foram selecionadas 274 amostras, 77 (28,10%) apresentaram deleção do gene pfhrp2, 160 (58,39%) deleção do gene pfhrp3 e 31 (11,32%) deleção de ambos os genes. Foram encontradas diferenças estatisticamente significativas na frequência de deleções no Acre (maior frequência de deleções de pfhrp3) e em Boa Vista (maior frequência de deleções de pfhrp2). Foi realizado RDT numa subamostra de 79 participantes, sendo encontrado 35,7% de amostras com testes negativos, sendo que a maior parte foi devida à baixa parasitemia; 8,93% possuíam a dupla deleção pfhrp2/pfhrp3. Conclusão: Os resultados encontrados no presente estudo foram compatíveis com estudos realizados na América Latina em áreas de alta prevalência dos parasitos mutantes e ressaltam a importância do monitoramento contínuo da presença e disseminação de parasitos com deleção de pfhrp2 para assegurar um melhor desempenho dos RDTs e contribuir com vigilância genômica da malária, e consequente eliminação da doença nas áreas endêmicas.