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https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/69125
AVALIAÇÃO DE CALYCOPHYLLUM SPRUCEANUM NA INIBIÇÃO DE FUNGOS DO GÊNERO SPOROTHRIX
Simões, Thaíse Reis | Date Issued:
2023
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Fármacos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract in Portuguese
A esporotricose, infecção causada por fungos do gênero Sporothrix, é uma micose subcutânea que acomete principalmente seres humanos e gatos. No Rio de Janeiro, a doença atinge proporções epidêmicas, sendo causada principalmente por S. brasiliensis, a espécie mais virulenta. O tratamento é longo, com medicamentos de alto custo e que possuem efeitos adversos. Além disso, os microrganismos estão apresentando resistência aos medicamentos comumente utilizados. Neste ponto, é importante a busca por alternativas terapêuticas de origem natural, e a espécie botânica Calycophyllum spruceanum (Benth.) Hook. f. ex K. Schum., pertencente à família Rubiaceae, destaca-se devido a seu uso pela população local contra infecções. Neste estudo, obtiveram-se diferentes extratos das cascas de C. spruceanum. Esses extratos foram submetidos a um mapeamento fitoquímico e a um screening microbiológico. Em seguida, realizou-se ensaio por microdiluição em placa contra fungos sensíveis e resistentes do gênero Sporothrix. Os resultados evidenciaram que o extrato com acetona (PERCOLADO) foi o que apresentou melhor efetividade contra os fungos Sporothrix sp. (CIM = 250 μg/mL), apresentando amplo espectro em relação aos demais (CIM > 250 μg/mL), principalmente contra S. brasiliensis, inclusive os de cepas resistentes. Portanto, esse extrato foi analisado por Cromatografia Líquida de Ultra-Eficiência, com detector de Arranjo de Diodos, acoplada à Espectrometria de Massas (CLUE-DAD-EM). Esse extrato mostrou uma maior seletividade dos constituintes presentes e, após a análise por CLAE-EM, demonstrou a presença de iridoides e seco-iridoides, diderrosídeo, 6-β-hidróxi-genipina e gardenosídeo, e de apocarotenoides crocetina e um derivado não descrito na literatura consultada Essas classes fitoquímicas possuem vias biossintéticas interligadas e atividades biológicas relatadas que podem ser associadas a atividade antimicrobiana verificada nos ensaios realizados. Esses resultados, apesar de preliminares, podem ser considerados uma contribuição relevante devido a dificuldade de se descobrir novos alvos moleculares contra esporotricose, principalmente a espécie de fungo que causa o maior número de relatos de pessoas infectadas no Brasil, o Sporothrix brasiliensis.
Abstract
Sporotrichosis, an infection caused by Sporothrix sp., is a subcutaneous mycosis that mainly affects humans and cats. In Rio de Janeiro, the disease reaches epidemic proportions, caused mainly by S. brasiliensis, the most virulent species. The treatment is long, with high-cost drugs that have adverse effects. In addition, the microorganisms are showing resistance to the commonly used drugs. At this point, it is important to search for therapeutic alternatives of natural origin, and the botanical species Calycophyllum. spruceanum (Benth.) Hook. f. ex K. Schum., from Rubiacee family, stands out due to its use by the local population against infections. In this study, different extracts of C. spruceanum bark were obtained. These extracts were submitted to phytochemical mapping and microbiological screening. Then, a plate microdilution assay was performed against sensitive and resistant fungi of the genus Sporothrix. The results showed that the extract with acetone (PERCOLATE) was the one that presented the effectiveness against the fungi Sporothrix sp. (MIC = 250 g/mL), with a broad spectrum compared to the others (MIC > 250 ug/mL), mainly against S. brasiliensis, including resistant strains. Therefore, this extract was analyzed by Ultra-Performance Liquid Chromatography, with Diode Array detector, coupled to Mass Spectrometry (UPLC DAD-MS). This extract showed a greater selectivity of the constituents present and, after analysis by HPLC-MS, demonstrated the presence of iridoids and seco-iridoids, diderroside, 6-ß-hydroxy-genipin and gardenoside, and of apocarotenoids crocetin and an undescribed derivative in the consulted literature. These phytochemical classes have interconnected biosynthetic pathways and reported biological activities that can be associated with the antimicrobial activity verified in the tests performed These results, although preliminary, can be considered a relevant contribution due to the difficulty of discovering new molecular targets against sporotrichosis, especially the fungus species that causes the highest number of reports of infected people in Brazil, Sporothrix brasiliensis.
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