Modulação da via autofágica em macrófagos infectados por micobactérias não tuberculosas (MNT)

Abstract

As infecções por micobactérias não tuberculosas (MNT) têm sido frequentemente observadas em diferentes regiões do mundo, acometendo seres humanos em diferentes tecidos. A doença pulmonar é a forma clínica mais comum dentre as infecções por MNT. Apresenta-se clinicamente de forma indistinguível da tuberculose (TB), o que torna o diagnóstico laboratorial diferencial pela identificação de espécies crucial para definição de um esquema terapêutico adequado. No entanto, estudos anteriores demonstraram que Mycobacterium abscessus, uma espécie de crescimento rápido, possui um número reduzido de opções terapêuticas para o tratamento de infecções pulmonares e em alguns casos são considerados incuráveis. Assim, o entendimento das vias moleculares relacionadas à sobrevivência e eliminação desse patógeno intracelular é fundamental para o desenvolvimento de alvos terapêuticos eficazes. A via autofágica, um mecanismo de homeostase celular, tem sido associada ao controle da carga bacilar em células infectadas com M. abscessus. No presente trabalho, avaliamos a modulação da autofagia em macrófagos infectados por M. abscessus subsp. massiliense, na presença ou na ausência de SARS-CoV-2 inativado. Observamos que o isolado clínico de morfotipo rugoso inibe o fluxo autofágico em macrófagos, diminuindo significativamente os níveis de distribuição de marcadores autofágicos, LC3-II e Lysotracker. Isolados clínicos de morfotipo liso promovem a ativação da autofagia em macrófagos, aumentando significativamente os níveis de LC3-II e Lysotracker. Tais dados sugerem que, no caso de infecções causadas por MNT, nem todas as espécies utilizam a modulação da via autofágica como mecanismo de escape imune e que a indução da autofagia não é suficiente para o controle da carga bacilar, como observado com M. tuberculosis e M. leprae. Dados anteriores demonstraram que antígenos de SARS-CoV-2 são capazes de modular a via autofágica. Assim, fomos investigar a capacidade de SARS-CoV-2 inativado contribuírem para a modulação da autofagia em macrófagos infectados por M. abscessus e a relação com o controle da carga bacilar. Antígenos de SARS-CoV-2 já foram associados ao bloqueio do fluxo autofágico. No presente estudo foi observado um bloqueio do fluxo autofágico em macrófagos estimulados somente com o SARS-CoV-2 inativado. Vimos também que macrófagos humanos infectados com o isolado clínico de morfotipo rugoso e estimulados com SARS-CoV-2 inativado, tiveram uma resposta autofágica alterada, aumentando os níveis de distribuição dos marcadores autofágicos. Em conjunto, nossos resultados demonstraram que o isolado clínico de morfotipo rugoso possui capacidade de evadir o fluxo autofágico em macrófagos humanos e que isolados clínicos de morfotipo liso estão susceptíveis à autofagia em macrófagos humanos, apesar de não ser suficiente para o controle da carga bacilar.