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Title: Comparação entre a citopatologia, histopatologia, imunocitoquímica e imuno-histoquímica em diferentes amostras biológicas no diagnóstico da leishmaniose visceral canina
Advisor: Pacheco, Tânia Maria Valente
Members of the board: Menezes, Rodrigo Caldas
Schubach, Armando de Oliveira
Figueiredo, Fabiano Borges
Quintella, Leonardo Pereira
Tortelly, Rogerio
Authors: Santos, Isabele Barbieri dos
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil
Abstract: A leishmaniose é uma doença infecto-parasitária que acomete seres humanos e animais, causada por protozoários do gênero Leishmania. As leishmanioses são importante problema de saúde pública em vários países e estão incluídas entre as seis endemias de maior relevância mundial. Classicamente a leishmaniose visceral canina (LVC) se caracteriza por caquexia progressiva, anemia, febre intermitente, linfadenomegalia generalizada, sinais oculares (conjuntivite, ceratoconjuntivite, uveite) e lesões cutâneas (dermatite exfoliativa, úlceras e alopecia). Para a confirmação do diagnóstico da LVC, é necessária a demonstração do agente etiológico nas amostras biológicas obtidas de lesões, aspirados de fígado, baço, medula óssea, pele íntegra ou de gânglios linfáticos. O presente estudo avaliou os exames citopatológico, histopatológico, imunohistoquímico e imunocitoquímico no diagnóstico da LVC, utilizando como padrão de referência a cultura parasitológica. Oitenta e um cães foram avaliados, foram incluídos no estudo 44 cães com isolamento em cultura parasitológica e caracterização de Leishmania (Leishmania) chagasi, isolada a partir de amostras de pele íntegra da orelha e/ou baço e/ ou lesão cutânea. Os cães foram submetidos à eutanásia e posteriormente a coleta de amostras biológicas para a realização do exame citopatológico (CP), exame histopatológico (HP), reação de imunocitoquímica (ICQ) e reação de imuno-histoquímica (IHQ). A maioria dos cães era do sexo masculino (61,3%; n=27) Treze cães (29,5%) foram provenientes do município do Rio de Janeiro e 70,5% (n=31) do município de Bauru-SP. A maioria dos cães apresentava bom estado geral (47,7%; n=21); 38,6% (n=17) estado geral ruim; 11,3% (n=5) estado geral regular. A presença de lesão cutânea foi observada em 11 (25%) animais. No CP foi possível à visualização de formas amastigotas em 29,5% (n=13) de raspados da escápula, 29,5% (n=13) de raspados da orelha; em 29.5% (n=13) de raspados do focinho; 45,5% (n=20) nos aspirados de medula óssea, 25% (n=11) nos aspirados de linfonodo cervical e 52,7% (n=23) nos aspirados do linfonodo poplíteo. No HP formas amastigotas foram observadas em 45,5% (n=20) de amostras de pele íntegra da escápula, 65,9% (n=29) do focinho e 52,3% (n=23) da orelha. Na ICQ formas amastigotas foram observadas em 47,8% (n=21) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 68,2% (n=30) pele íntegra do focinho; 56,8% (n=25) pele íntegra da orelha; 63,6% (n=28) nos aspirados de medula óssea, 36,7% (n=16) nos aspirados de linfonodo cervical e 68,2% (n=30) nos aspirados do linfonodo poplíteo. Na IHQ formas amastigotas foram observadas em 52,3% (n=23) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 88,6% (n=39) do focinho e 72,7% (n=31) da orelha. A IHQ dos fragmentos de pele íntegra do focinho apresentou maior sensibilidade quando comparado com CP e de raspados de pele íntegra da orelha, focinho, escápula e de lesões cutâneas e de aspirados de linfonodos e medula óssea e ao HP dos fragmentos de pele íntegra da escápula, do focinho e da orelha. A boa sensibilidade da IHQ em amostras biológicas obtidas de fragmentos de pele íntegra do focinho sugere a utilização desta técnica no diagnóstico parasitológico da leishmaniose canina, apesar do custo mais elevado, quando comparada ao CP e ao HP
Abstract: Leishmaniasis is a parasitic infectious disease caused by pr otozoa of the genus Leishmania, that affects humans and animals. In many countries Leishmaniasis are important public health problem and are included among the six world's most significant endemic diseases. According to literature canine visceral leishmaniasis (CVL) is usuall y characterized by progressive emaciation, anemia, intermittent fever, generalized lymphadenopathy, eye signs (conjunctivitis, keratitis, uveitis) and skin lesions (exfoliative dermatitis, alopecia and ulcers). To grant CVL diagnosis, the identification o f the etiologic agent in biological samples obtained from lesions is primal. S ampling can be obtained from aspirates of liver, spleen, bone marrow, intact skin or lymph nodes. The aim of this study was to compare the cytopathological, histopathological, im munohistochemical and immunocytochemical diagnosis of leishmaniasis in dogs, using as reference the standard parasitological culture. Forty - four dogs with parasitological culture isolation and characterization of Leishmania (Leishmania) chagasi isolated an d from samples of intact skin of the ear and / or spleen and / or skin lesion, were included in the study. Subsequently the animals were euthanized and collection of biological samples for citopahatol ogy test (CP), histopathology ( H P ), immunocytochemistry (ICC) and immunohistochemistry (IHC). Most dogs were male (61.3%, n = 27). Thirteen dogs (29.5%) were from Rio de Janeiro and 70.5% (n = 31) from Bauru, Brazil. There were 47.7%, ( n = 21) intact dogs, 38.6% (n = 17) dogs in poor general health condition and 11.3% (n = 5) in regular general health state. S kin lesions were observed in 11 (25%) animals. In the C P was possible to identify the amastigotes in 29.5% (n = 13) from scapula scrapings, 29.5% (n = 13) of ear scrapings, 29.5% (n = 13) from snouts scra pings, 45.5% (n = 20) in bone marrow aspirates, 25% (n = 11) in cervical lymph node aspirates and 52.7% (n = 23) in the popliteal lymph node aspirates. In H P amastigotes were detected in 45.5% (n = 20) samples of shoulders , 65.9% (n = 29) snout and 52.3% ( n = 23) the ear healthy skin. In ICQ amastigotes were observed in 47.8% (n = 21) samples from shoulder intact skin, 68.2% (n = 30) intact snout skin, 56.8% (n = 25) intact ear skin , 63.6% (n = 28) in bone marrow aspirates, 36.7% (n = 16) in cervical lymph node aspirates and 68.2% (n = 30) in the popliteal lymph node aspirates. In IHC amastigotes were placed in 52.3% (n = 23) samples from shoulder healthy skin, 88.6% (n = 39) of snout and 72.7% (n = 31) of the ear. IHC from fragments of intact snout skin sho wed higher sensitivity when compared with CP and shaved intact skin of the ear, nose, scapula and skin lesions and lymph node aspirates and bone mar row and also compared with the H P fragments of intact shoulder skin, muzzle and ear . The good sensitivity o f IHC in biological samples obtained from fragments of intact snout skin suggests the use of this technique in parasitological diagnosis for canine leishmaniasis, despite th e higher cost compared to the CP and HP
DeCS: Cães
Imuno-Histoquímica
Leishmaniose
Estudos de Coortes
Issue Date: 2011
Citation: SANTOS, I. B. Comparação da citopatologia, histopatologia, imunocito-química e imuno-histoquímica em amostras de diferentes tecidos no di-agnóstico da leishmaniose visceral canina. 2010. 88f. Tese (Doutorado em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas) - Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, 2011.
Date of defense: 2011
Place of defense: Rio de Janeiro/RJ
Department: Pós-Graduação em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas
Program: Programa de Pós-Graduação em Pesquisa Clínica em Doenças Infecciosas
Copyright: open access
Appears in Collections:INI - PCDI - Teses de Doutorado

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