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2030-01-01
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- IOC - Artigos de Periódicos [12821]
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INCREASING IN CYSTEINE PROTEINASE B EXPRESSION AND ENZYMATIC ACTIVITY DURING IN VITRO DIFFERENTIATION OF LEISHMANIA (VIANNIA) BRAZILIENSIS: FIRST EVIDENCE OF MODULATION DURING MORPHOLOGICAL TRANSITION
Cysteine proteinases B
Cathepsin L
Z-Phe-Arg 7-amido-4-methylcoumarin
hydrochloride
Z-Phe-Phe-fluoromethyl ketoneand
Trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido(4- guanidino)butane
Author
Affilliation
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunoparasitologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Ultraestrutura Celular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Ultraestrutura Celular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Imunoparasitologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Ultraestrutura Celular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Ultraestrutura Celular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Biologia Molecular e Doenças Endêmicas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract
Leishmania (Viannia) braziliensis presents adaptive protease-dependent mechanisms, as cysteine proteinases B (CPB). This study investigates the expression of three cpb gene isoforms and CPB enzymatic activity during the parasite differentiation. Relative expression levels of LbrM.08.0810 gene were assessed, exhibiting a higher quantity of transcripts in the logarithmic promastigotes phase than in the stationary promastigotes phase (>1.5 times). The cbp gene tends to decrease during acid pH shock and increases when the temperature rises (>1.3 times). LbrM.08.0820 and LbrM.08.0830 genes exhibited similar expression profiles to LbrM.08.0810 gene, with lower levels being observed overall. The proteolytic activity exhibits a gradual increase during the parasite's differentiation with low levels in samples of logarithmic promastigotes phase (3.2 ± 0.08 mmol min(-1) mg protein(-1)) to a peak of activity after 72 h of incubation at 32 °C (4.2 ± 0.026 mmol min(-1) mg protein(-1)) followed by a subsequent decrease of 68 % of peak activity levels after 96 h of incubation at 32 °C (2.8 ± 0.37 mmol min(-1) mg protein(-1)). These activities were also measured in the presence of selective inhibitors for cysteine proteinases, such as Z-Phe-Phe-fluoromethyl ketone and trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido(4-guanidino)butane, demonstrating their source as cathepsin-like proteinases. To the best of our knowledge, this report presents the first description of a modulation of cathepsin L-like expression during the L. (V.) braziliensis in vitro differentiation induced by acid pH and high temperature.
Keywords
Leishmania (Viannia) braziliensisCysteine proteinases B
Cathepsin L
Z-Phe-Arg 7-amido-4-methylcoumarin
hydrochloride
Z-Phe-Phe-fluoromethyl ketoneand
Trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido(4- guanidino)butane
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