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Title: Identificação morfológica e molecular de Didymozoidae (Trematoda, Digenea) parasitos de Thunnus obesus (Scombridae) ocorrentes ao largo da costa do Estado do Rio de Janeiro
Advisor: Cohen, Simone Chinicz
Members of the board: Silva, Rosângela Rodrigues e
Takemoto, Ricardo Massato
Silva, Jairo Pinheiro da
Iñiguez, Alena Mayo
Pereira, Luís Cláudio Muniz
Authors: Silva, Ana Maria Moreira da
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: Os Tuníneos são peixes ósseos marinhos, tipicamente pelágicos, pertencentes à família Scombridae e representam um dos principais recursos pesqueiros do Brasil. Thunnus obesus, (Lowe), conhecido comumente no Brasil como albacora bandolim, é uma espécie com ampla distribuição geográfica em águas tropicais e subtropicais. São altamente migratórios, o que favorece a infecção por diferentes grupos de helmintos, principalmente espécies da família Didymozoidae Monticelli, 1888. Os trematódeos pertencentes à esta família representam um grupo de parasitos que usualmente vivem encistados aos pares nos tecidos de teleósteos marinhos, principalmente Scombridae. O objetivo deste estudo foi identificar e caracterizar morfometricamente e molecularmente trematódeos da família Didymozoidae parasitos de T. obesus coletados ao largo da costa do estado do Rio de Janeiro. Foram obtidos 12 exemplares de T. obesus diretamente de comerciantes no Mercado Municipal de São Pedro em Niterói, Rio de Janeiro. Os peixes apresentaram peso variando de 3,015 a 5,215 Kg e comprimento padrão variando de 53 a 64 cm sendo 3 fêmeas e 9 machos. Para estudos morfológicos pela microscopia de luz, os parasitos foram fixados em AFA com ou sem compressão entre lâmina e lamínula, corados em carmim alcoólico de Langeron, desidratados em série alcoólica, clarificados em óleo de cravo e montados em lâminas em bálsamo do Canadá. Para as análises genéticas, o DNA foi extraído utilizando a digestão física em nitrogênio líquido, química com Proteinase K, seguido do Kit DNeasy Plant Mini. Para PCR foi usado o alvo ITS2 e posterior sequenciamento nucleotídico Oito diferentes espécies foram identificadas de acordo com a morfologia: Platocystis vivipara (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1987, Didymocystis lamotheargumedoi Kohn e Justo, 2008, Didymocystis neothunni (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1996, Didymosulcus philobranchiarca (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1990, Koellikerioides internogastricus Yamaguti, 1970, Koellikerioides intestinalis Yamaguti, 1970, Didymozoidae gen. sp. 1 e Didymozoidae gen sp. 2. Foram obtidas sequências nucleotídicas de cinco espécies: Koellikerioides internogastricus (n=4), Didymosulcus philobranchiarca (n=2), Didymocystis neothunni (n=1), Platocystis vivípara (n=2) e Didymozoidae gen. sp. 1 (n=1). Apesar da pouca informação genética disponível da família, o resultado da análise permitiu que fossem realizados alinhamentos onde foram observados polimorfismos e matrizes de distância genética intra e interespecíficas, além de uma matriz de distância intergênica. Este é o primeiro estudo de taxonomia integrativa de didimozoídeos parasitos de T. obesus coletados na costa brasileira, sendo o primeiro com abordagens moleculares de didimozoídeos marinhos do Brasil. Platocystis vivipara é registrada pela primeira vez na América do Sul, ampliando sua distribuição geográfica, T. obesus é registrado como novo hospedeiro para D. lamotheargumedoi, D. neothunni é pela primeira vez registrado em T. obesus no Brasil, região do Atlântico Sul Ocidental, além de informação genética inédita para cinco espécies do estudo. Esse estudo expande o conhecimento morfológico, molecular e a distribuição geográfica da família Didymozoidae na América do Sul.
Abstract: The Thunnini are bony marine fishes, typically pelagic, belonging to the family Scombridae and represent one of the most important fishing resources of Brazil. Thunnus obesus (Lowe), commonly known as \201Calbacora bandolim\201D is a species with worldwide geographical distribution in tropical and subtropical waters. They are highly migratory fishes, which favors the infection by different group of helminths, specially species from the family Didymozoidae Monticelli, 1888. Trematodes belonging to Didymozoidae represent a group of parasites that generally lives encysted in pairs in marine teleosteans tissues, mainly Scombridae. The aim of this study was to identify and characterize morphometrically and molecularly species of the family Didymozoidae parasites of T. obesus collected from the coast of Rio de Janeiro State. Twelve specimens of T. obesus were obtained from sellers in municipal Market of Niteroi, Rio de Janeiro, with weight varying from 3,015 to 5,215 Kg and length from 53 to 64 cm, being 3 females and 9 males. For morphological studies by ligth microscopy, parasites were fixed in AFA with or without compression, stained in alcoholic-acid carmine, dehydrated in alcohol series, cleared in clove oil and mounted in Canada balsam. For genetic analysis, DNA was extracted using the physical digeston with liquid nitrogen, chemical by proteinase K, followed by Kit DNeasy Plant Mini. For the PCR it was used ITS2 as target and posteriorly nucleotide sequencing. Eight different species were identified according to morphological characterization: Platocystis vivipara (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1987, Didymocystis lamotheargumedoi Kohn e Justo, 2008, Didymocystis neothunni (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1996, Didymosulcus philobranchiarca (Yamaguti, 1970) Pozdnyakov, 1990, Koellikerioides internogastricus Yamaguti, 1970, Koellikerioides intestinalis Yamaguti, 1970, Didymozoidae gen. sp. 1 and Didymozoidae gen sp. 2 Nucleotide sequencing were obtained for five species: Koellikerioides internogastricus (n=4), Didymosulcus philobranchiarca (n=2), Didymocystis neothunni (n=1), Platocystis vivipara (n=2) and Didymozoidae gen. sp. 1 (n=1). Despite little genetic information available for the family, the results of the analysis promoted alignments where polimorphisms and genetic distance matrices inter and intraespecific were observed, as well as intergenic distance matrix. This is the first study on integrative taxonomy of didymozoids parasites from T. obesus collected from Brazilian coast, with molecular approaches from marine didymozoids from Brazil. Platocystis vivipara is reported for the first time in South America, expanding its geographical distribution, T. obesus is recorded as new host for D. lamotheargumedoi, D. neothunni is reported for the first time in T. obesus in Brasil, South Atlantic region, besides the unpublished genetic information for the five studied species. The presente study broad the morphological, molecular and biogeographical knowledge of Didymozoidae from South America.
keywords: Trematódeos
Tipagem Molecular
Atum
Issue Date: 2018
Citation: SILVA, Ana Maria Moreira da. Identificação morfológica e molecular de Didymozoidae (Trematoda, Digenea) parasitos de Thunnus obesus (Scombridae) ocorrentes ao largo da costa do Estado do Rio de Janeiro. 2018. 101 f. Dissertação (Mestrado em Biodiversidade e Saúde) - Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2018.
Date of defense: 2018
Place of defense: Rio de Janeiro/RJ
Department: Pós-Graduação em Biodiversidade e Saúde
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz
Program: Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade e Saúde
Copyright: restricted access
Appears in Collections:IOC - PGBS - Dissertações de Mestrado

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