Desenvolvimento de ELISA indireto para detecção de anticorpos IgG Anti-RBD da linhagem de referência B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e análise deste anticorpo com a gravidade da COVID-19

Abstract

A avaliação da soropositividade dos infectados pelo Coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2) mostra-se importante para o aprimoramento da interpretação clínica da presença de anticorpos IgG nas diferentes formas da Doença do Coronavírus 2019 (COVID-19). Para isto, faz-se necessário a construção de testes sorológicos acurados que possam auxiliar na compressão da imunopatogênese da COVID-19. O objetivo deste trabalho consiste em desenvolver e avaliar um ELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e analisar estes anticorpos com a severidade da COVID-19. A proteína RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 foi produzida in vitro e utilizada como antígeno no ensaio imunoadsorvente ligado à enzima indireto (ELISA) para detecção de anticorpos IgG séricos em amostras obtidas por conveniência de um biorrepositório. Os soros foram provenientes de pacientes internados no Hospital dos Servidores do Estado de Pernambuco (HSE-PE), com sintomatologia, RT-PCR e/ou sorologia positiva para infecção pelo SARS-CoV-2. O ELISA produzido foi submetido aos testes de validação demostrando 92,4% sensibilidade, 97% especificidade e 95% de acurácia. Dos 100 indivíduos hospitalizados por COVID-19 avaliados, 72 foram inclusos no estudo, dos quais 90% foram positivos para anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2 e 10% negativos. Entre os soropositivos, 55% desenvolveram a forma leve da COVID-19 e 45% progrediram para a COVID-19 grave, estando o desenvolvimento da forma grave da COVID-19 associada a presença de hipertensão, asma, anemia, linfocitopenia, leucocitose, aumento dos níveis de CK, AST e glicemia. Portanto, o teste de ELISA indireto desenvolvido e aplicado neste trabalho apresentou-se acurado para classificação de indivíduos quanto a presença de anticorpos IgG anti-RBD da linhagem B (Hu-1) do SARS-CoV-2. Como também, a detecção destes anticorpos demostra-se associada a COVID-19 leve e ao desfecho clínico de alta.