Avaliação da produção de INF-y nas PBMCs estimuladas pelo candidato a vacina de tuberculose fp-1 em indivíduos expostos ao Mycobacterium tuberculosis

Abstract

Introdução: a tuberculose (TB) é uma das doenças infeciosas mais letais do mundo e apenas uma única vacina está disponível e aprovada para a imunização contra a tuberculose: a Bacillus Calmette-Guérin (BCG), por este motivo há necessidade de desenvolver uma vacina que possa substituir ou complementar a BCG. O presente trabalho avaliou a produção de Interferon-gama (IFN-) pelas células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos expostos ao Mycobacterium tuberculosis (Mtb) após estimulação in vitro com um novo candidato a vacina de tuberculose: a Proteína-1 de Fusão (FP-1). Métodos: foram recrutados participantes HIV soronegativos, contactos de pacientes diagnosticados com tuberculose pulmonar, e com resultado positivo ao teste de interferon gama 1 (QFT1 - CD4) e (QFT2 - CD8), nos centros de saúde da Machava II e Mavalane, em Moçambique. Estes participantes foram seguidos durante dois anos, com intervalos de seis meses entre as coletas. Em cada visita foi realizada a coleta de dados clínicos e epidemiológicos, além de amostras de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). A avaliação da resposta celular frente aos antígenos Ag85B, ESAT-6 e o candidato FP-1 foi realizada por ELISPOT, no qual a produção de IFN- foi quantificada. Os resultados foram expressos em SFUs (Unidades Formadoras de Spots) e comparadas entre os antígenos estudados, tempo de acompanhamento e exposição à infeção. Resultados: dos 67 participantes contactos de pacientes com tuberculose pulmonar, 35 foram positivos para IFN- específico de M.tuberculosis, como verificado pelos testes de QFT. Quanto a produção de IFN- não se verificou nenhuma diferença estatisticamente significativa quando comparada ao estímulo com FP-1 e com os peptídeos Ag85B e ESAT-6 (ρ >0.05). Na correlação de speaman`srho entre a produção de IFN- e a contagem de células TCD8 e TCD4, houve tendência de maior produção de IFN- associado a maior contagem de TCD4 na segunda visita e maior contagem de TCD8 associado a maior produção de IFN- na terceira visita, no entanto, a diferença não foi estatisticamente significativa. A correlação entre o resultado do teste QFT e a produção de IFN- induzida pelo FP-1 mostrou que as amostras mais reativas ao QFT1 eram as que mais produziam IFN- (ρ=0.047), enquanto que não se verificou associação entre o QFT2 e a produção de IFN- (ρ =0.085). Conclusão: O candidato a vacina de tuberculose FP-1 induziu a produção de IFN- em PBMC de indivíduos com possível infeção latente por M.tb ao longo do tempo em níveis comparáveis aos atuais antígenos padrão do M.tb (Ag85B e ESAT-6) em todos os grupos e tempos estudados. Portanto, de forma geral, o FP-1 parece ter potencial como candidato vacinal, porém estudos adicionais devem ser realizados para decifrar essa resposta e os mecanismos envolvidos.