Estudo colaborativo para calibração do padrão de referência nacional de antitoxina tetânica

Abstract

O tétano é uma doença imunoprevinível causada pela ação de uma neurotoxina altamente potente produzida pela bactéria anaeróbia Clostridium tetani, que se desenvolve a partir da infecção de lesões na pele com esporos deste microrganismo, resultando em espasmos e contrações generalizadas da musculatura esquelética. O tratamento consiste em eliminar o bacilo, tratar os sinais e sintomas clínicos e neutralizar a toxina tetânica, com uso de imunoglobulina homóloga (de origem humana) ou heteróloga (de origem equina, conhecida como Soro Antitetânico - SAT). A vacinação é o meio mais eficaz, seguro e econômico para prevenção do tétano. As vacinas e soros são disponibilizadas pelo Programa Nacional de Imunizações/Sistema Único de Saúde (PNI/SUS) e o Laboratório de Vacinas Bacterianas e Soros Hiperimunes do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde da Fundação Oswaldo Cruz (INCQS/Fiocruz) é o laboratório nacional de controle da qualidade responsável pela liberação destes produtos para uso no PNI e por fornecer o Padrão de Referência Nacional de Antitoxina Tetânica (PN) para os produtores de vacinas e SAT do país. O PN é aferido a cada novo lote frente ao Padrão Internacional. Em 2023, a ressuspensão de um novo lote exigiu uma nova calibração da potência. Dessa forma, o objetivo deste projeto foi realizar um estudo colaborativo, com a participação dos produtores nacionais de soros e vacinas, para calibração da potência do PN fornecido pelo INCQS, utilizando pela primeira vez o efeito paralisante da toxina tetânica como desfecho humanitário do ensaio de soroneutralização in vivo, em substituição à letalidade, a partir da publicação dessa nova metodologia pela Farmacopeia Brasileira 6ª edição (2019). Para isso, foram distribuídas alíquotas do novo lote do PN para os produtores que já implementaram o refinamento em suas rotinas. Cada participante recebeu treinamento para execução dos ensaios e realizaram no mínimo três ensaios válidos, assim como o INCQS. Os resultados foram calculados com o auxílio do software CombiStats®️ para obtenção da dose efetiva 50% (DE50) e da potência em unidades internacionais (UI/mL). Após a combinação dos 11 resultados válidos, a média geométrica semi-ponderada do PN foi 8,40 UI/mL, intervalo de confiança 97,2%-102,9%, coeficientes de variação intralaboratorial de 6,15% Lab.A; 2,57% Lab.B; 2,94% Lab.C e interlaboratorial de 4,72%. A baixa variabilidade dos resultados demonstrou a excelente harmonização do refinamento da metodologia e a recomendação do uso do novo lote reconstituído do PN com a potência nominal de 8,4UI/mL.