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Title: Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp
Advisor: Nóbrega, Armi Wanderley da
Abrantes, Shirley de Mello Pereira
Members of the board: Zamith, Helena Pereira da Silva
Madeira, Maria de Fátima
Mazzei, André Albert
Authors: Mello, Cintia Xavier
Affilliation: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
Abstract: As Leishmanioses constituem umgrupo de doenças infecciosas, não contagiosas, causadas por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo transmitidas pela picada de fêmeas de insetos conhecidos como flebotomíneos, apresentando-se sob duas formas clínicas: Leishmaniose tegumentar americana e Leishmaniose visceral. O diagnóstico de certeza é realizado por demonstração do parasito podendo ser feita através de inoculação de fragmentos de lesão ou outro material clínico em meios de cultura específicos. Um dos inconvenientes desse método é a possibilidade de contaminação da cultura, o que inviabiliza o exame Para evitar essa contaminação alguns cuidados são tomados como a utilização de antibióticos (benzilpenicilina e estreptomicina) e antifúngico (flucitosina) que são adicionados à solução de coleta e a utilização de antibióticos no meio de cultura. O conhecimento da estabilidadee as concentrações ideais dos compostos utilizados são fatores importantes a serem considerados, pois podem determinar o sucesso do diagnóstico. Neste estudo avaliamos a estabilidade e o efeito dessas substâncias no crescimento do parasito in vitro. Para análise da estabilidade foi primeiramente desenvolvido um método para separação das substâncias de interesse por Cromatografia líquida de alta eficiência que se mostrou muito eficazpara a separação, os resultados desta análise mostraram que o antibiótico benzilpenicilina sofreu cerca de 10% de degradação no prazo de 4 dias a 4 ºC e cerca de 20% de degradação durante 24 horas a temperatura ambiente enquanto a concentração de estreptomicina permaneceu praticamente inalterada sob as mesmas condições. Esses resultados mostram a importância da utilização correta dessas soluções a fim de evitar perda da sua atividade. Com relação à inibição do crescimento do parasito in vitro, as concentrações de 1000, 500 U/mL de benzilpenicilina e 1000, 500 μg/mL de estreptomicina e flucitosina assim como 200 U/mL benzilpenicilina + 200 μg/mL estreptomicina mostraram inibição significativa do crescimento, mostrando que as concentrações de benzilpenicilina e estreptomicina na composição de culturas de Leishmania sp.devem ser abaixo de 200 U/mL e 200 μg/mL, respectivamente.
Abstract: The Leishmaniasis is a group of infectious diseases, not contagious, caused by different species of protozoa of the genus Leishmaniaand is transmitted by the bite of insects known as the female sandfly, presenting clinics in two forms: Leishmaniasis and Visceral Leishmaniasis. The diagnosis of certainty is achieved by demonstration of the parasite can be done by inoculation of fragments of injury or otherclinical material in culture specific. One of the drawbacks of this method is the possibility of contamination of culture, which makes the examination to avoid contamination that some care is taken as the use of antibiotics (benzylpenicillin and streptomycin) and antifungal (flucytosine) that are added to the collection and use of solution of antibiotics in the culture medium. Knowledge of the stability and the optimal concentrations of the compounds used are important factors to be considered, as they may determine the success of the diagnosis. This study evaluated the stability and the effect of these substances in the growth of the parasite in vitro. For analysis of stability was first developed a method for separation of substances of interest by HPLC which was highly effective for the separation, the results of this analysis showed that the antibiotic benzylpenicillin suffered about 10% of degradation within 4 days to 4 ºC and about 20% of degradation for 24 hours at room temperature while the concentration of streptomycin remained virtually unchanged under the same conditions. These results show the importance of correct use of these solutions to avoid loss of its activity. Regarding the inhibition of growth of the parasite in vitro, the concentrations of1000, 500 U/ mL benzylpenicillin and 1000, 500 μg/mL streptomycin and flucytosine and 200 U/mL benzylpenicillin + 200 μg/mL streptomycin showed inhibition significant growth, showing that concentrations ofbenzylpenicillin and streptomycin in the composition of cultures of Leishmania sp.must be below 200 U/mL and 200 μg/mL, respectively.
DeCS: Leishmania
Cromatografia Liquida de Alta Pressão
Inibição de Crescimento in Vitro
Vigilância Sanitária
Issue Date: 2009
Citation: MELLO, C. X. Otimização do preparo de meio de cultura Schneider para o isolamento de Leishmania sp. 2009. 38 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Especialização em Controle da Qualidade em Produtos, Ambientes e Serviços Vinculados à Vigilância Sanitária) - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2009.
Date of defense: 2009
Place of defense: Rio de Janeiro/RJ
Department: Coordenação de Pós-Graduação
Defense institution: Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde
Program: Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária
Copyright: open access
Appears in Collections:INCQS - Trabalhos de Conclusão de Curso - Especialização

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