Advisor | Nogueira, Ana Cristina Martins de Almeida | |
Author | Gomes, Glísia Mendes Tavares | |
Access date | 2019-12-17T19:35:09Z | |
Available date | 2019-12-17T19:35:09Z | |
Document date | 2016 | |
Citation | GOMES, G. M. T. Avaliação da estabilidade de amostras positivas para Leishmaniose visceral canina. 2016. 87 f. Dissertação (Mestrado em Vigilância Sanitária)-Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2016. | pt_BR |
URI | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/38666 | |
Abstract in Portuguese | A leishmaniose visceral (LV) denota grande importância no cenário da saúde pública e, por conseguinte, no âmbito da Vigilância Sanitária, visto que a infecção pode acometer tanto humanos quanto cães, sendo estes últimos os reservatórios do agente etiológico Leishmania (Leishmania) infantum. Limitações diagnósticas relacionadas a investigações sorológicas caninas de “menor” especificidade e análises citopatológicas complexas, morosas e pouco sensíveis, podem comprometer um controle mais efetivo dessa doença. A qualidade dos kits empregados no apoio diagnóstico é bastante relevante, bem como compreender o comportamento das amostras sorológicas empregadas na avaliação desses métodos, quando sujeitas a condições diversas como diferentes temperaturas e ciclos de congelamento e descongelamento. O foco do presente trabalho foi a avaliação analítica de amostras de soro e plasma, positivas para leishmaniose visceral canina (LVC) pelo teste imunocromatográfico (TR DPP® LVC) e EIE® LVC, submetidas a mais de 12 ciclos de congelamento e descongelamento, e estocadas por várias semanas a diferentes temperaturas a fim de verificar uma possível queda do título desses espécimes, além da padronização de uma técnica por citometria de fluxo para análise dessas amostras. Nossos resultados demonstraram um comportamento diferenciado das amostras de acordo com a técnica utilizada. O teste de triagem para LVC (TR DPP LVC®) demonstrou baixa especificidade para amostras com baixos títulos de anticorpos quando submetidas a diferentes ciclos de congelamento e descongelamento. Já o teste confirmatório imunoenzimático para diagnóstico de LVC (EIE® LVC) evidenciou possuir maior sensibilidade na avaliação de amostras expostas a condições ambientais adversas, permanecendo positivas, apesar de em alguns casos ter sido observado um decaimento no título de anticorpos. O ensaio de citometria de fluxo por nós padronizado, utilizando microesferas carboxiladas adsorvidas com antígeno recombinante de Leishmania (rK28), demonstrou ser uma técnica bastante viável para a avaliação qualitativa e quantitativa de anticorpos presentes em amostras caninas positivas e negativas para LV e que sem dúvida merece uma maior atenção e aprimoramento. | pt_BR |
Language | por | pt_BR |
Rights | open access | pt_BR |
Subject in Portuguese | Testes Sorológicos | pt_BR |
Subject in Portuguese | Estabilidade | pt_BR |
Subject in Portuguese | Controle de Qualidade | pt_BR |
Subject in Portuguese | Citometria de Fluxo | pt_BR |
Title | Avaliação da estabilidade de amostras positivas para Leishmaniose visceral canina | pt_BR |
Type | Dissertation | pt_BR |
Defense date | 2016-07-27 | |
Departament | Coordenação de Pós-Graduação | pt_BR |
Defense Institution | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde | pt_BR |
Degree level | Mestrado Acadêmico | pt_BR |
Place of Defense | Rio de Janeiro/RJ | pt_BR |
Program | Programa de Pós-Graduação em Vigilância Sanitária | pt_BR |
Co-Advisor | De luca, Paula Mello | |
Abstract | Visceral Leishmaniasis (LV) denotes a great importance in public health scene and therefore within the scope of the Sanitary Surveillance, since infection can affect both humans and dogs, the latter being reservoirs of the etiologic agent Leishmania (Leishmania) infantum. Diagnostic limitations related to canine serological investigations of “minor” specific and complex cytological analysis, time-consuming and not very sensitive, can compromise a more effective control of disease. The quality of kits used in supporting diagnostic is highly relevant as well as the understanding of the behavior of the serum samples used in the validation and evaluation of these methods, when exposure to variable conditions such as different temperatures and cycles of freezing and thawing. The focus of our study was the analytical evaluation of serum and plasma samples, positive for canine visceral leishmaniasis (CVL) by immunoassay (TR DPP® LVC) and EIE® LVC. Samples were submitted to more than 12 cycles of freezing and thawing, and stored for several weeks at different temperatures to assess a possible fall in the antibody titles of these specimens, as well as the standardization of a flow cytometry technique to analyze the samples. Our results showed a different behavior of the samples according to the technique used. The screening test for LVC (TR LVC® DPP) showed low specificity for samples with low antibody titers when submitted to different cycles of freezing and thawing. On the other hand, the immunoassay confirmatory test for diagnosing LVC (EIE® CVL) has demonstrated higher sensitivity in the evaluation of samples exposed to adverse environmental conditions, remaining positive, although in some cases it was observed a decay in the antibody titers. The flow cytometry test standardized by us using carboxylated microspheres adsorbed with recombinant Leishmania antigen (rK28) demonstrated to be a viable technique for the qualitative and quantitative evaluation of antibody titers present in positive and negative canine VL serum samples and certainly deserves greater attention and improvement. | pt_BR |
Affilliation | Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. | pt_BR |
Subject | Serologic tests | pt_BR |
Subject | Stability | pt_BR |
Subject | Quality Control | pt_BR |
Subject | Flow Cytometry | pt_BR |
Member of the board | Almeida, Antônio Eugênio Castro Cardoso de | |
Member of the board | Ocampo, Jurandy Susana Patrícia Morales | |
Member of the board | Gripp, Carmem Beatriz Wagner Giacoia | |
Member of the board | Nogueira, Ana Cristina Martins de Almeida | |
Member of the board | De Luca, Paula Mello | |
DeCS | Leishmaniose Visceral | pt_BR |
DeCS | Testes Sorológicos | pt_BR |
DeCS | Citometria de Fluxo | pt_BR |
DeCS | Vigilância Sanitária | pt_BR |
DeCS | Controle de Qualidade | pt_BR |