Estudo sobre a aplicabilidade do método alternativo HET-CAM em bateria de ensaios preditivos para a irritação e dano severo ocular

Abstract

Ao longo da história, os seres humanos têm utilizado animais em experimentos científicos desde a Grécia Antiga. Até meados do século XX, muitos produtos eram distribuídos à população sem qualquer forma de fiscalização, o que poderia resultar em danos à saúde dos usuários, de acordo com a literatura disponível. Foi só após um acidente ter causado a morte de uma consumidora, que surgiu a indispensabilidade de haver um maior monitoramento quanto à regulamentação de produtos cosméticos. Neste contexto, em 1944, John Draize desenvolveu seu polêmico teste. Considerado como uma das referências na validação dos métodos alternativos para o desfecho de dano ocular, o Teste de Draize consiste na aplicação de substâncias-teste no olho do coelho, a fim de serem observados efeitos irritantes na córnea, íris e conjuntiva do animal. O princípio dos 3Rs, criado por Russel e Burch em 1959, foi um grande marco na experimentação animal e fundamenta- se no uso de modelos in vivo e in vitro em pesquisa científica, visando diminuir o sofrimento e o estresse dos animais em teste e, no limite, promover a sua substituição. No Brasil, o grande marco regulatório no contexto da regulamentação de animais no ensino e em pesquisa científica é a Lei Arouca. Um dos métodos alternativos em busca de reconhecimento e validação internacional é o método HET CAM. Proposto por Luepke & Kemper, em 1985, este ensaio consiste em analisar possíveis alterações nos vasos da membrana cório-alantóide do ovo embrionado de galinha. Objetivos: Estabelecer a aplicabilidade do método HET-CAM em baterias de ensaios para avaliar o potencial de irritação e dano severo ocular de substâncias químicas. Métodos: Revisão bibliográfica sobre os campos de aplicação e aceitação regulatória de métodos alternativos com potencial preditivo para irritação e dano severo ocular. As buscas foram realizadas nas bases de dados indexadas: Portal de Periódicos da CAPES, PUBMED, SCIELO e GOOGLE SCHOLAR e através da ferramenta de busca TSAR. Elaborou-se ainda, um questionário eletrônico a fim de obter amplo conhecimento sobre a percepção e o interesse dos integrantes da Rede Nacional de Métodos Alternativos ao uso de animais (RENAMA) em aplicar o método HET-CAM em seus laboratórios. Todos os cuidados éticos visando à confidencialidade e autonomia de participação foram garantidos. Resultados: Os resultados das buscas em literatura científica revelaram existir, em sua maioria, métodos alternativos validados baseados em efeitos na córnea. A investigação conduzida junto aos laboratórios da RENAMA, por meio do instrumento eletrônico, apontou algumas limitações do HET-CAM, apesar do método possuir relevância nos contextos científico e acadêmico. Quanto às questões éticas, percebemos uma grande lacuna de conhecimento no que se refere à utilização de experimentação animal e instrumentos do CONCEA e sobre a Lei Arouca. Conclusão: O estudo alcançou seus objetivos ao analisar a aplicabilidade do HET-CAM por meio da literatura científica e questionários eletrônicos, destacando a contribuição e limitações do método. Revelou-se falta de conhecimento sobre alguns instrumentos do CONCEA e da Lei Arouca, indicando uma lacuna significativa na compreensão da utilização de alguns modelos in vivo em experimentação científica. A pesquisa apontou falta de consenso sobre a necessidade de autorização prévia da CEUA para formas embrionárias, como por exemplo, o ovo embrionado de galinha no método HET-CAM. Conclui-se que é crucial oferecer treinamentos em princípios éticos de pesquisa com animais para toda a RENAMA. Por fim, o presente trabalho pode servir como modelo para o planejamento futuro de iniciativas na Rede, auxiliando na tomada de decisões e avaliação da viabilidade de novos projetos de pesquisa.